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Nested polymerase chain reaction for detection of the avian leukosis virus causing so-called fowl glioma 

Authors: H. Hatai a;  K. Ochiai a;  Y. Tomioka a;  T. Toyoda a;  K. Hayashi a;  M. Anada b;  M. Kato b;  A. Toda b;  K. Ohashi c;  E. Ono d;  T. Kimura a; T. Umemura a
Affiliations:   a Laboratory of Comparative Pathology,
b Toyama Municipal Office, Toyama, Japan
c Laboratory of Infectious Disease, Graduate School of Veterinary Medicine, Hokkaido University, Sapporo, Japan
d Laboratory of Animal Experiment for Disease Model, Institute for Genetic Medicine, Hokkaido University, Sapporo, Japan
DOI: 10.1080/03079450500368086
Publication Frequency: 6 issues per year
Published in: journal Avian Pathology, Volume 34, Issue 6 December 2005 , pages 473 - 479
Formats available: HTML (English) : PDF (English)
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Abstract

The complete nucleotide sequence of the avian leukosis virus causing so-called fowl glioma has been previously determined. Primers were designed for detection of the fowl glioma-causal virus (FGV) based on the 3' untranslated region of the viral genome. The provirus and viral RNA of FGV were specifically detected in various organs and tissues, including feather pulp, from experimentally infected birds using nested polymerase chain reaction (PCR) and reverse transcription nested PCR. The prevalence of FGV was evaluated in 131 Japanese fowls of a zoological garden in Japan based on the detection of the FGV genome in feather pulp using PCR and the detection of viral antigen in faeces by enzyme-linked immunosorbent assay. FGV proviral DNA was detected in feather pulp of 52 birds (39.7%) by nested PCR. Later, nine dead birds from among the 52 were histologically diagnosed as having fowl glioma and found to have the proviral DNA in the affected brain. These results demonstrated that the PCR-based detection of FGV in feather pulp is useful for epidemiological studies on fowl glioma.

Reacuteaction de polymeacuterisation en chaicircne nicheacutee pour la deacutetection du virus de la leucose responsable du gliome des poules

La seacutequence nucleacuteotidique complegravete du virus de la leucose aviaire responsable du gliome des poules a eacuteteacute preacuteceacutedemment deacutetermineacutee. Des amorces ont eacuteteacute choisies pour la deacutetection du virus responsable du gliome des poules (FGV), baseacutees sur la reacutegion 3' non traduite (UTR) du geacutenome viral. Le provirus et l'ARN viral du FGV ont eacuteteacute deacutetecteacutes speacutecifiquement dans diffeacuterents organes et tissus, incluant la pulpe de plume, agrave partir d'animaux infecteacutes expeacuterimentalement, en utilisant respectivement la reacuteaction de polymeacuterisation en chaicircne (PCR) nicheacutee ou une transcription inverse (RT) suivie d'une PCR nicheacutee. La preacutevalence du FGV a eacuteteacute eacutevalueacutee agrave partir de 131 poules japonaises d'un jardin zoologique au Japon par deacutetection du geacutenome du FGV dans la pulpe de plume utilisant la PCR et par deacutetection de l'antigegravene viral dans les fegraveces par ELISA. L'ADN proviral du FGV a eacuteteacute deacutetecteacute dans la pulpe de plume chez 52 sujets (39.7%) par PCR nicheacutee. Par la suite, 9 sujets sur les 52 eacutetudieacutes sont morts. Ils ont fait l'objet d'un examen histologique qui a montreacute la preacutesence de gliome, de plus l'ADN proviral a eacuteteacute mis en eacutevidence dans le cerveau affecteacute. Ces reacutesultats ont montreacute que la deacutetection par PCR du FGV dans la pulpe de plume est utile pour les eacutetudes eacutepideacutemiologiques du gliome des poules.

Nested Polymerasekettenreaktion zum Nachweis von das sogenannte Gefluumlgelgliom verursachendem aviaumlren Leukosevirus

Die komplette Nukleotidsequenz des aviaumlren Leukosevirus, das das sogenannte Gefluumlgelgliom induziert, ist kuumlrzlich ermittelt worden. Basierend auf der untranslatierten Region (UTR) des viralen Genoms wurden Primer entwickelt fuumlr den Nachweis des Gefuumlgelgliom verursachenden Virus (FGV). Das Provirus und virale RNS des FGV wurden spezifisch unter Verwendung von nested Polymerasekettenreaktion (PCR) und Reverse Transkriptase (RT) nested PCR in verschiedenen Organen und Geweben, einschlieszliglich Federfollikeln, experimentell infizierter Tiere nachgewiesen. Das Vorkommen von FGV wurde bei 131 japanischen galliformen Voumlgeln in einem Zoo in Japan durch den Nachweis von FGV-Genom in Federfollikeln mittels PCR und von viralem Antigen in Faumlzes anhand eines Enzymimmunotests uumlberpruumlft. Provirale FGV-DNS wurde mit der nested PCR in den Federfollikeln von 52 (39,7%) Voumlgeln festgestellt. Spaumlter wurde bei 9 toten Voumlgeln von diesen 52 Voumlgeln histologisch Gefluumlgelgliome diagnostiziert und in den betroffenen Gehirnen provirale DNS nachgewiesen. Diese Ergebnisse zeigen, dass der PCR basierte Nachweis von FGV in Federfollikeln fuumlr epidemiologische Studien zur Verbreitung von Gefluumlgelgliomen geeignet ist.

Reaccioacuten en cadena de la polimerasa anidada para detectar el virus de leucosis aviar que causa el llamado glioma aviar

La secuencia completa del virus de leucosis aviar que causa el llamado glioma aviar ya ha sido determinado previamente. Se disentildearon cebadores para detectar el virus causante del glioma aviar (FGV) en base a la regioacuten no codificante (UTR) 3' del genoma viacuterico. El provirus y el ARN viacuterico del FGV se detectaron especiacuteficamente en varios oacuterganos y tejidos, incluida la pulpa de pluma, de aves infectadas experimentalmente mediante una teacutecnica anidada de reaccioacuten en cadena de la polimerasa (PCR) y transcriptasa reversa (RT) PCR anidada. La prevalencia de FGV fue evaluada en 131 aves japonesas de un parque zooloacutegico en Japoacuten en base a la deteccioacuten del genoma de FGV en pulpa de pluma utilizando la PCR y a la deteccioacuten del antiacutegeno viacuterico en heces mediante ELISA. El ADN del provirus de FGV se detectoacute en la pulpa de la pluma de 52 (39.7%) aves mediante PCR anidada. Posteriormente, a 9 aves muertas de un total de 52 se les diagnosticoacute histoloacutegicamente un glioma aviar y se le detectoacute ADN proviral en el cerebro afectado. Estos resultados demuestran que la PCR basada en la deteccioacuten de FGV en pulpa de pluma es uacutetil en los estudios epidemioloacutegicos de glioma aviar.
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