Nested polymerase chain reaction for detection of the avian leukosis virus causing so-called fowl glioma
Authors:
H. Hatai a;
K. Ochiai a;
Y. Tomioka a;
T. Toyoda a;
K. Hayashi a;
M. Anada b;
M. Kato b;
A. Toda b;
K. Ohashi c;
E. Ono d;
T. Kimura a;
T. Umemura a
| Affiliations: | a Laboratory of Comparative Pathology, |
| b Toyama Municipal Office, Toyama, Japan | |
| c Laboratory of Infectious Disease, Graduate School of Veterinary Medicine, Hokkaido University, Sapporo, Japan | |
| d Laboratory of Animal Experiment for Disease Model, Institute for Genetic Medicine, Hokkaido University, Sapporo, Japan |
DOI:
10.1080/03079450500368086
Publication Frequency:
6 issues per year
Subjects:
Agriculture & Environmental Sciences;
Virology;
Formats available:
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Abstract
The complete nucleotide sequence of the avian leukosis virus causing so-called fowl glioma has been previously determined. Primers were designed for detection of the fowl glioma-causal virus (FGV) based on the 3' untranslated region of the viral genome. The provirus and viral RNA of FGV were specifically detected in various organs and tissues, including feather pulp, from experimentally infected birds using nested polymerase chain reaction (PCR) and reverse transcription nested PCR. The prevalence of FGV was evaluated in 131 Japanese fowls of a zoological garden in Japan based on the detection of the FGV genome in feather pulp using PCR and the detection of viral antigen in faeces by enzyme-linked immunosorbent assay. FGV proviral DNA was detected in feather pulp of 52 birds (39.7%) by nested PCR. Later, nine dead birds from among the 52 were histologically diagnosed as having fowl glioma and found to have the proviral DNA in the affected brain. These results demonstrated that the PCR-based detection of FGV in feather pulp is useful for epidemiological studies on fowl glioma.
R action de polym risation en cha ne nich e pour la d tection du virus de la leucose responsable du gliome des poules
La s quence nucl otidique compl te du virus de la leucose aviaire responsable du gliome des poules a t pr c demment d termin e. Des amorces ont t choisies pour la d tection du virus responsable du gliome des poules (FGV), bas es sur la r gion 3' non traduite (UTR) du g nome viral. Le provirus et l'ARN viral du FGV ont t d tect s sp cifiquement dans diff rents organes et tissus, incluant la pulpe de plume, partir d'animaux infect s exp rimentalement, en utilisant respectivement la r action de polym risation en cha ne (PCR) nich e ou une transcription inverse (RT) suivie d'une PCR nich e. La pr valence du FGV a t valu e partir de 131 poules japonaises d'un jardin zoologique au Japon par d tection du g nome du FGV dans la pulpe de plume utilisant la PCR et par d tection de l'antig ne viral dans les f ces par ELISA. L'ADN proviral du FGV a t d tect dans la pulpe de plume chez 52 sujets (39.7%) par PCR nich e. Par la suite, 9 sujets sur les 52 tudi s sont morts. Ils ont fait l'objet d'un examen histologique qui a montr la pr sence de gliome, de plus l'ADN proviral a t mis en vidence dans le cerveau affect . Ces r sultats ont montr que la d tection par PCR du FGV dans la pulpe de plume est utile pour les tudes pid miologiques du gliome des poules.
Nested Polymerasekettenreaktion zum Nachweis von das sogenannte Gefl gelgliom verursachendem avi ren Leukosevirus
Die komplette Nukleotidsequenz des avi ren Leukosevirus, das das sogenannte Gefl gelgliom induziert, ist k rzlich ermittelt worden. Basierend auf der untranslatierten Region (UTR) des viralen Genoms wurden Primer entwickelt f r den Nachweis des Gef gelgliom verursachenden Virus (FGV). Das Provirus und virale RNS des FGV wurden spezifisch unter Verwendung von nested Polymerasekettenreaktion (PCR) und Reverse Transkriptase (RT) nested PCR in verschiedenen Organen und Geweben, einschlie lich Federfollikeln, experimentell infizierter Tiere nachgewiesen. Das Vorkommen von FGV wurde bei 131 japanischen galliformen V geln in einem Zoo in Japan durch den Nachweis von FGV-Genom in Federfollikeln mittels PCR und von viralem Antigen in F zes anhand eines Enzymimmunotests berpr ft. Provirale FGV-DNS wurde mit der nested PCR in den Federfollikeln von 52 (39,7%) V geln festgestellt. Sp ter wurde bei 9 toten V geln von diesen 52 V geln histologisch Gefl gelgliome diagnostiziert und in den betroffenen Gehirnen provirale DNS nachgewiesen. Diese Ergebnisse zeigen, dass der PCR basierte Nachweis von FGV in Federfollikeln f r epidemiologische Studien zur Verbreitung von Gefl gelgliomen geeignet ist.
Reacci n en cadena de la polimerasa anidada para detectar el virus de leucosis aviar que causa el llamado glioma aviar
La secuencia completa del virus de leucosis aviar que causa el llamado glioma aviar ya ha sido determinado previamente. Se dise aron cebadores para detectar el virus causante del glioma aviar (FGV) en base a la regi n no codificante (UTR) 3' del genoma v rico. El provirus y el ARN v rico del FGV se detectaron espec ficamente en varios rganos y tejidos, incluida la pulpa de pluma, de aves infectadas experimentalmente mediante una t cnica anidada de reacci n en cadena de la polimerasa (PCR) y transcriptasa reversa (RT) PCR anidada. La prevalencia de FGV fue evaluada en 131 aves japonesas de un parque zool gico en Jap n en base a la detecci n del genoma de FGV en pulpa de pluma utilizando la PCR y a la detecci n del ant geno v rico en heces mediante ELISA. El ADN del provirus de FGV se detect en la pulpa de la pluma de 52 (39.7%) aves mediante PCR anidada. Posteriormente, a 9 aves muertas de un total de 52 se les diagnostic histol gicamente un glioma aviar y se le detect ADN proviral en el cerebro afectado. Estos resultados demuestran que la PCR basada en la detecci n de FGV en pulpa de pluma es til en los estudios epidemiol gicos de glioma aviar.
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action de polym
ne nich
te du virus de la leucose aviaire responsable du gliome des poules a
partir d'animaux infect
gelgliom verursachendem avi
ren Leukosevirus
lich Federfollikeln, experimentell infizierter Tiere nachgewiesen. Das Vorkommen von FGV wurde bei 131 japanischen galliformen V
geln in einem Zoo in Japan durch den Nachweis von FGV-Genom in Federfollikeln mittels PCR und von viralem Antigen in F
n en cadena de la polimerasa anidada para detectar el virus de leucosis aviar que causa el llamado glioma aviar
aron cebadores para detectar el virus causante del glioma aviar (FGV) en base a la regi
rico. El provirus y el ARN v
til en los estudios epidemiol
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